蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法

蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法一般來說，有以下五種：凱氏定氮法，雙縮尿法（Biuret法）、Folin－酚試劑法（Lowry法）、紫外吸收法和考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）。

表五種蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法的比較

      從以上表格中可以得出，不同的方法有不同的特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)，如紫外吸收法測(cè)定時(shí)間快。但是綜合起來，zui后一種考馬斯亮藍(lán)法（Bradford法）效率zui高，無論是測(cè)定時(shí)間，靈敏度還是受干擾程度，都是比較占優(yōu)勢(shì)的。

    下面，我們來重點(diǎn)介紹一下其中一種蛋白質(zhì)含量測(cè)定方法--凱氏定氮法。

凱氏定氮法（Kjedahl法）

首先將濃硫酸倒入樣品中，邊倒邊搖晃，以使?jié)饬蛩崤c樣品充分接觸，然后加熱試劑。如果你需要加快實(shí)驗(yàn)進(jìn)度，可以加入CuSO4作催化劑，這樣，實(shí)驗(yàn)的反應(yīng)時(shí)間就會(huì)大大縮短。CH₂COOH和H₂SO₄反應(yīng)生成氨氣，然后氨氣又與H₂SO₄發(fā)生作用，固定了氮元素。這時(shí)我們得到了（NH₄）₂SO₄的溶液，然后我們可以用NaOH去跟硫酸銨反應(yīng)，通過計(jì)算NaOH的使用量，就可以計(jì)算出氮的含量。下面是整個(gè)定氮法中發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)。

    CH₂COOH+ 3H₂SO₄ = 2CO₂ + 3SO₂ +4H₂O +NH₃    （1）

    2NH₃ + H₂SO₄= （NH₄）₂SO₄                       （2）

    （NH₄）₂SO₄ + 2NaOH =2H₂O +Na₂SO₄ + 2NH₃        （3）

       當(dāng)我們得到氮的含量以后，我們就可以通過一定的計(jì)算，zui終算出蛋白質(zhì)的含量。

       凱氏定氮法常用于有機(jī)化合物中的氮含量的測(cè)定，是蛋白質(zhì)含量測(cè)定的經(jīng)典方法，雖然在測(cè)試過程中，試劑用量很大，但是，不可否認(rèn)，它所適用的樣品范圍之廣，測(cè)試結(jié)果之，都是*的。

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